高壓蒸汽滅菌生物指標菌使用規程

高壓蒸汽滅菌生物指標菌使用規程
目的：
    建立高壓蒸汽滅菌生物指標菌—嗜熱脂肪桿菌芽胞（ATCC7953）菌片的使用規程，保證正確使用，對高壓蒸汽滅菌效果進行驗證。
  2.  依據：    
     高壓蒸汽滅菌生物指標菌（嗜熱脂肪桿菌芽胞ATCC7953）菌片使用說明書。
    3.  范圍：
     本標準適用于用高壓蒸汽滅菌生物指標菌—嗜熱脂肪桿菌芽胞（ATCC7953）菌片對高壓蒸汽滅菌效果進行的監測。
    4.  職責：
     壓力蒸汽滅菌器操作人員、QA檢查員、QC微生物檢驗員對本標準的實施負責。
    5.  程序：
    5.1.  采用生物滅菌指標菌來檢查高壓蒸汽滅菌效果是最科學、可靠的檢測方法。嗜熱脂肪桿菌芽胞 （ATCC7953 ） 是國際公認的生物指標菌。該菌具有以下特點：  
    5.1.1.  最適生長繁殖溫度為56℃,培養24小時即可形成菌落。
    5.1.2.  該菌為需氧芽胞桿菌，其細菌繁殖體對培養基要求低，在溴甲酚紫葡萄糖蛋白胨瓊脂上呈米黃色。
    5.1.3.  該菌無毒，熱抗性穩定，在4℃冰箱下保存6個月抗力無明顯下降，在常溫下（20℃左右）可保存1個月。
熱死亡時間為121℃，3.9分鐘陽性，19分鐘陰性，D10值1.3~1.9分鐘,符合美國藥典規定標準。
    5.2.  結構：本生物指示劑由菌片、恢復培養基和外管組成，菌片由嗜熱脂肪桿菌芽胞（ATCC7953）制備而成，染菌量為5.0×105~5.0×106cfu/片。
    5.3.  使用方法：
5.3.1. 本生物指示劑適用于各型壓力蒸汽滅菌器滅菌效果的監測。
5.3.2. 使用時，將生物指示劑放入標準檢測包的中心或待滅菌物品包的中心，置于
滅菌器的規定位置。
5.3.3. 按規定的滅菌溫度和時間進行滅菌處理。
5.3.4. 滅菌完畢，即刻將生物指示劑取出，蓋朝上垂直握于手中，用專門工具或一
夾子夾住菌管下部，將管內安瓿擠碎，讓培養液流出浸沒菌片。然后將菌管放于56℃溫箱內或配套的微型培養器內培養24小時觀察初步結果，48小時觀察最終結果。
    5.4.  結果判定：培養后生物指示劑的培養液由紫色變為黃色即表示有菌生長、判定為滅菌不合格；仍為紫色者為無菌生長，判定為滅菌合格。
    5.5.  注意事項：
    5.5.1.  生物指示劑管從壓力蒸汽滅菌器內取出或從冰箱內取出需在室溫下放10min左右，再夾碎安瓿，以免過熱或過冷夾碎外管。
    5.5.2.  恢復培養液在56℃培養時間過長（72小時以上），陽性管黃色容易消退，培養液逐漸干燥，應注意每天觀察，隨時記錄陽性結果。
    6.  附：
    生物指標菌測試滅菌效果記錄ZL0075 00。