食用菌消毒滅菌

引言：微生物在自然界中的分布很廣，食用菌生產中所涉及到的原料、用水、設備、空氣等都著大量的真菌、細菌、放線菌、病毒等微生物和蟲害，它們無時無刻在與食用菌爭奪養料和侵害食用菌。這些雜菌和病蟲害給食用菌生產造成很大為害和損失。在食用菌制務虛和栽培中，消滅和抑制有害微生物的活動，對食用攻進行純培養是很有必要的，故消毒滅菌是食用菌生產過程中很重要的一環。
幾個重要概念：
滅菌：是指在一定的范圍內用物質物理或化學的方法，徹底殺滅物料、容器、用具和空氣中的所有微生物。
消毒：是指用物理或化學的方法，殺滅物料中、物體表面及環境中的一部分微生物，即只能殺死微生物的營養體，不能殺死微生物的休眠體。
防腐：是指用物理學或化學的方法，暫時抑制微生物的生長。
除菌：是一種用機械的方法（如過濾、離心分離、靜電吸附等）除去液體或氣體中微生物的方法。
 

第一節  培養基質的消毒滅菌
基質消毒滅菌包括對培養基、培養料的微生物進行殺滅，它是對食用菌純培養的必要條件。一般采用熱力滅菌、拌藥消毒等方法。
一、熱力滅菌：是利用高溫使菌體蛋白變性，從而失去活性，達到滅菌的目的。常采用濕熱滅菌的方法對培養基質進行滅菌，因為熱蒸氣的穿透力強，蛋白質的凝固點隨含水量的增加而降低。又根據采用不同的儀器、溫度、時間及壓力指標分為高壓蒸氣滅菌、常壓滅菌、常壓間歇滅菌、發酵殺菌（巴氏消毒）等方法。
 1、高壓蒸氣滅菌：將滅菌物置于密封 的高壓鍋內，利用加壓高溫蒸氣在較短的時間內達到徹底滅菌的方法。常用的高壓鍋類型有：手提式，立式，臥式；
（1）液體培養基在1公斤/平方厘米下，處理20~30分鐘，溫度約為121℃。
（2）固體培養基在1.5kg/平方厘米下，處理1~2小時，溫度為128℃
高壓蒸氣滅菌的使用步驟：加水至水位線—→裝物—→加蓋—→加熱溫—→放冷氣—→升壓保壓—→降壓排氣—→出鍋
注意：（1）裝鍋不要擺得太擠，以免影響蒸汽流通和滅菌效果。
（2）加蓋，對角線旋緊螺旋。
（3）壓力未降至0時，切勿打開鍋蓋，否則突然降壓，招致培養基沸騰，沾濕棉塞，甚至沖出管外。
2、常壓滅菌：將滅菌物置于滅菌鍋內，以自然壓力的蒸氣進行滅菌的方法。100℃保持8個小時。滅菌灶使用方法：100℃開始計時，維持8～10h。
注意：溫度要盡快升至100℃，中途不能停火，經常補充熱水。
優點：建灶成本低，容量大。
缺點：滅菌時間長、能源消耗量大。
 3、常壓間歇滅菌：在沒有高壓滅菌設備的條件下，或對一些不宜用100℃以上溫度而又須殺滅其中的細菌芽孢的物質的滅菌，可采用此法。具體做法：將培養基或其它滅菌物置于滅菌鍋里，經100℃的熱蒸氣30~100分鐘
4、發酵殺菌：在食用菌生產中經常采用培養料堆制發酵的方法，由微生物的代謝熱所產生的高溫，使培養料發酵熟的同時，以巴氏消毒的原理，殺死培養料中雜菌的營養體、害蟲的幼蟲及卵。
二、拌藥消毒
在食用菌的生料栽培的過程中，對培養料進行拌料時，通常要加入0.1%多菌靈或甲基托布津等殺菌劑，以殺死雜菌或以制雜菌的生長。

 

第二節 接種與培養環境的消毒滅菌
一、消毒殺菌劑
化學消毒殺菌劑廣泛用于食用菌生產過程中的消毒滅菌，其主要種類有：
1、重金屬鹽類：如汞、銀、鋁、鋅、銅等。
殺菌機理：是通過與蛋白質結合而引起蛋白質變性。低濃度的重金屬對微生物起到抑制或殺死作用。微生物浸在0.1~0.5 %硝酸銀升汞溶液中，幾分種就會死亡。
常用0.1~0.2%升汞溶液對玻璃器皿、非金屬器械及用于菌種分離的菌菇、菇木進行表面消毒。
2、氧化劑：如高錳酸鉀、過氧化氫、臭氧、漂白粉等。
殺菌作用：通過強烈的氧化作用，破壞微生物的原生質或酶蛋白質結構。
3、還原劑：如甲醛，5%的甲醛可殺死細菌芽孢和真菌孢子。
甲醛能與微生物細胞蛋白質的氨基酸結合，引起蛋白質變性。使原生質失去正常活動能力。
 4、表面活性劑：如乙醇，70%乙醇的消毒力最強，過高過低消毒效果都差。
常用于接種前手指消毒及不耐熱制品的消毒。
 5、其它消毒劑：石灰，以4份生石灰加入1份水，即生成熟石灰、并放出熱，具有殺菌作用。硫磺，常用于培養室和出菇房等空間熏蒸殺菌。殺菌機理：硫磺粉燃燒后產生二氧化硫，二氧化硫與水作用生成亞硫酸，亞硫酸能奪取菌體細胞中的氧，菌體細胞因脫氧至死。
二、表面消毒殺菌
    表面消毒常用于菌種的分離材料、接種人員的手、器材、工作臺面、墻壁等的殺菌處理，表面消毒劑的種類很多，一般是通過涂抹、噴霧、浸泡、洗刷等方法使用。
 1、菌種分離材料的表面消毒：子實體未外露的，用0.1%升汞溶液浸泡1分鐘；子實體已外露的種菇材料，只能用75%酒精棉球擦菌蓋表面和菌柄，不能浸泡在升汞溶液中。
 2、手的表面消毒：先用肥皂洗手，再用1~2%來蘇爾等溶液浸泡2分鐘。接種前用之于75%酒精擦手。
 3、接種工具的消毒殺菌，先用75%酒精擦拭刀片、鑷子、接種鏟等工具，然后用酒精燈火焰燃燒。
 4、器皿的殺菌：利用高溫空氣進行干熱滅菌，具體方法是：，生產中也常用高壓蒸汽滅菌法對器皿進行滅菌。
 5、墻壁、臺面、菇床的表面消毒：常用字2~5%的漂白粉洗刷接種室、培養室墻壁、地面、床架、用具等。
三、室內空間殺菌
   接種箱、培養室、出菇房的空間消毒主要采用紫外線殺菌和氣體滅菌法，還可輔以空間噴霧的方法，增強殺菌的效果。
 1、紫外線殺菌法
適用：一般應用于無菌室、接種箱、超凈工作臺內的滅菌。只適用于空氣和物體表面的消毒。
使用方法：一般照射20～30min，可殺死空氣中95%的細菌。應該在黑暗中使用紫外線。
殺菌機理：導致菌體細胞內核酸和酶發生光化學變化，而使細胞死亡；紫外線可使空氣中的氧氣產生臭氧，臭氧也具殺菌作用。
 2、氣體滅菌法（熏蒸殺菌法）
適用：接種箱、接種室和菇房消毒。
常用藥物：40%甲醛溶液、硫磺、菇保一號、科達氣霧消毒盒、克霉靈氣霧消毒劑。